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生物資訊

無血清培養(yǎng)基的相關(guān)知識

作者:admin 來源:本站 發(fā)布時間: 2014-09-25 14:12  瀏覽次數(shù):
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lonza 無血清 培養(yǎng)基  網(wǎng)址鏈接 http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2013/0331/5024.html

 

誰能幫忙總結(jié)一下,無血清培養(yǎng)基的成分,用于什么方面,注意什么,優(yōu)缺點等等。

無血清培養(yǎng)基是設(shè)計用來在無血清條件下生長特殊類型的細胞或進行專門應(yīng)用的培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基的使用體現(xiàn)了一種重要的工具,它允許細胞培養(yǎng)在一套限定的條件下進行,盡可能免于干擾參數(shù)的影響。

優(yōu)點:增加確定性,性能更加一致,容易進行純化和下游加工,細胞功能的精確評估,增強生長和增加產(chǎn)量,生理反應(yīng)性的較好對照,增強細胞內(nèi)中介物的檢測。
無血清培養(yǎng)基中沒有添加血清,但可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。
無血清培養(yǎng)基的用途很廣,如血液和骨髓細胞、雜交瘤細胞、昆蟲細胞、293細胞、中華倉鼠卵巢(CHO)細胞、神經(jīng)細胞、哺乳動物細胞等均有相應(yīng)的無血清培養(yǎng)基可供選擇。
在使用無血清培養(yǎng)基時,有些細胞需要逐漸適應(yīng)的過程,即先將原來的培養(yǎng)基與無血清培養(yǎng)基混合培養(yǎng),漸漸地再轉(zhuǎn)為完全的無血清培養(yǎng)。有些貼壁生長的細胞,復(fù)蘇時可用少量的血清(如5%)先培養(yǎng),因為血清可助細胞貼壁,然后再換為無血清培養(yǎng)基。
 
由于天然培養(yǎng)基都含有血清,血清的成分十分復(fù)雜,對某些研究,血清可能影響實驗結(jié)果,因此無血清培養(yǎng)基日益受到人們的重視。
無血清培養(yǎng)基由下面成分組成:
1 基礎(chǔ)培養(yǎng)液
很多人工合成的培養(yǎng)基使用的是HamF12 和DMEM培養(yǎng)液(1:1混合),補加15mM的HEPES ,1.2g/升NaHCO3,根據(jù)不同的細胞需求還補加其它成分.
2 附加成分
a,細胞外基質(zhì),能幫助細胞附著
b,營養(yǎng)成分,能促進細胞增殖,如多種生長因子
c,蛋白酶抑制物
 
 
 無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點:
一、優(yōu)點:
1、無血清培養(yǎng)基完全采用人工合成的化合物,因此成分確定,可以排除血清中未知成分的干擾,實驗結(jié)果更為可靠。
2、采用無血清培養(yǎng)基更容易發(fā)現(xiàn)一些在血清培養(yǎng)基中不容易發(fā)現(xiàn)的細胞因子。
3、采用無血清培養(yǎng)基可提高生物制品的質(zhì)量,純度,方便產(chǎn)物的分離純化,減少過敏源。
二、缺點:
1、成本較高。
2、針對性很強,一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細胞的培養(yǎng)。
 
由于天然培養(yǎng)基都含有血清,血清的成分十分復(fù)雜,對某些研究,血清可能影響實驗結(jié)果,因此無血清培養(yǎng)基日益受到人們的重視。
無血清培養(yǎng)基由下面成分組成:
1 基礎(chǔ)培養(yǎng)液
很多人工合成的培養(yǎng)基使用的是HamF12 和DMEM培養(yǎng)液(1:1混合),補加15mM的HEPES ,1.2g/升NaHCO3,根據(jù)不同的細胞需求還補加其它成分.
2 附加成分
a,細胞外基質(zhì),能幫助細胞附著
b,營養(yǎng)成分,能促進細胞增殖,如多種生長因子
c,蛋白酶抑制物
作者:xxiil 時間:2009-08-24  共0人支持此評論
 無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點:
一、優(yōu)點:
1、無血清培養(yǎng)基完全采用人工合成的化合物,因此成分確定,可以排除血清中未知成分的干擾,實驗結(jié)果更為可靠。
2、采用無血清培養(yǎng)基更容易發(fā)現(xiàn)一些在血清培養(yǎng)基中不容易發(fā)現(xiàn)的細胞因子。
3、采用無血清培養(yǎng)基可提高生物制品的質(zhì)量,純度,方便產(chǎn)物的分離純化,減少過敏源。
二、缺點:
1、成本較高。
2、針對性很強,一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細胞的培養(yǎng)。     
作者:xxiil 時間:2009-08-24  共0人支持此評論
無血清培養(yǎng)基分為三種:一種是SFM(Serum free)不含血清,但是有蛋白質(zhì)。一種是PFM(Protein Free)血清和蛋白質(zhì)都沒有,可能會有些短肽。CDM(chemical define)純化學(xué)合成的,成分完全已知。至于究竟要選擇那種無血清培養(yǎng)基,要看自己的細胞種類,以及用途來定了。

1.無血清培養(yǎng)基一般用于細胞清洗,大部分細胞都不能用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng),否則細胞很難存活.
 2.部分細胞在消化培養(yǎng)后先用含血清培養(yǎng)基培養(yǎng),待細胞完全貼壁后可換無血清培養(yǎng)基,以消除血清成分對實驗處理因素的干擾.
 3.在生長因子、蛋白質(zhì)工程、基因表達調(diào)控等研究領(lǐng)域,迫切需要用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,因為基因工程主要對象是蛋白質(zhì).
 4.無血清培養(yǎng)基目前發(fā)展還屬于初級階段,還不能取代完全培養(yǎng)基的主要地位.

 

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