LONZA鱟試劑資料http://www.hcnanjing.cn/a/gb2312/product/lonza/2010/0928/3762.html
新的2010版《----操作規(guī)程》明確了每3個月做一次內毒素檢測。各位院感人都有建立和熟悉內毒素檢測方法的過程。過去凡是醫(yī)院藥劑科制備滅菌制劑的，對內毒素檢測并不陌生。但對于來自不同行業(yè)的院感人，可能有些茫然，不知道如何下手。許多人咨詢我，內毒素檢測，怎么做？誰來做？需要什么儀器設備？試劑怎么買？等等疑問接踵而至。我建議大家去藥劑科咨詢，有條件看些相關資料。下面，就相關問題逐一總結上傳，供初入門的人員參考。
如何去選擇鱟試劑和內毒素檢測方法？
-內毒素檢測新手必看
顯色基質鱟試劑、凝膠法鱟試劑、特異性鱟試劑、動態(tài)濁度法鱟試劑、比色法鱟試劑、顯色法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、濁度法鱟試劑、動態(tài)比濁法鱟試劑、棄G因子鱟試劑、終點顯色法鱟試劑...。如果你是一位剛準備做內毒素檢測的工作人員，看到有這么多種鱟試劑，是不是有個疑問：“這么多種鱟試劑，我該怎么選擇呢？”別急，不要被這么多名字嚇到了，以下為您詳細分類介紹：
一、什么是鱟試劑。
鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動物“鱟”的蘭色血液中提取變形細胞溶解物，經低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專用于細菌內毒素檢測。
二、鱟試劑的分類：
1、按原料來源分：
全世界有5個種屬的鱟，其中僅有中國鱟(又名三刺鱟）Tachypleus tridentatus Leach和美洲鱟 Limulus polyphemus Linnaeus可制造鱟試劑，對應生產出來的鱟試劑分別為中國鱟鱟試劑（Tachypleus Amebocyte Lysate），縮寫為TAL；美洲鱟鱟試劑（Limulus Amebocyte Lysate），縮寫為LAL。TAL與LAL有相同的功效。
2、按檢測方法分：
中國藥典2005年版中收錄了2種細菌內毒素檢查法，即凝膠法和光度測定法，后者包括濁度法和顯色基質法。供試品檢測時，可使用其中任何一種方法進行試驗。當測定結果有爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠法結果為準。
三、鱟試驗的內毒素檢查方法
細菌內毒素檢查法詳見05年中國藥典附錄。【論壇內有相關介紹，請搜索】。
四、內毒素的檢測原理：
1、凝膠法：系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時應加無熱原水（細菌內毒素檢查用水）復溶后使用。2005年版藥典中凝膠法鱟試劑結果的判斷：保溫60分鐘±2分鐘后觀察結果。部分商家所說的半小時出結果的快速凝膠法鱟試劑是沒有依據(jù)的，沒到時間就觀察結果可能導致假陰性。特異性鱟試劑（又叫棄G因子鱟試劑）是凝膠法鱟試劑的一種，細菌內毒素及β-葡聚糖均能與鱟試劑發(fā)生凝聚反應。特異性鱟試劑就是屏蔽β-葡聚糖引起的鱟試劑凝聚反應，使鱟試劑僅與內毒素起反應。一般中草藥注射液成份復雜，干擾因素較多，常含有β-葡聚糖或內毒素類似物。用特異性鱟試劑能減少或消除假陽性反應。（應做對比及干擾試驗）。
2、光度測定法：
光度測定法又分為濁度法和顯色基質法，這2種方法都是定量檢測內毒素的方法。
濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程過程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。根據(jù)檢測原理，可分為終點濁度法和動態(tài)濁度法。終點濁度法未見已商品化產品，不再贅述。動態(tài)濁度（比濁）法是檢測反應混合物的濁度到達某一預先設定的吸光度所需要的反應時間，或是檢測濁度增加速度的方法。
顯色基質法系利用鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內毒素含量的方法，因使用分光光度計或酶標儀器，又稱為比色法。根據(jù)檢測原理，分為終點顯色法和動態(tài)顯色法。國內已有顯色基質鱟試劑盒(終點法)，早期有上海伊華以鱟三肽為原料做成的鱟試劑盒，廈門鱟試劑廠于2005推出以鱟四肽為原料的鱟試劑盒，也有少量國外產品，但到貨周期長，價格遠高于國產試劑。動態(tài)比色法與終點比色基本原理差不多。國產暫無動態(tài)比色法，相信很快就會面市。
五、方法與試劑選擇：
如果您僅需要檢測樣品的內毒素限量，則應選擇凝膠法鱟試劑，通過確定內毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù)，做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。
如果您需要定量測定樣品中內毒素含量則應選擇顯色基質鱟試劑或動態(tài)濁度法鱟試劑。動態(tài)濁度法鱟試劑一般需要配備專用的動態(tài)濁度儀或帶有特定軟件的酶標儀，比較適合樣品量較多的用戶。（顯色基質鱟試劑用酶標儀或分光光度計檢測。是樣品數(shù)較少（少于200-300個），設備比較簡陋的用戶。如果已有內毒素檢測專用酶標儀，則可選擇顯色基質鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑。
最后小結：鱟試劑就分定性和定量2種，定性就選凝膠法（特殊產品用特異性鱟試劑）。定量就是顯色法鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑（根據(jù)已有儀器條件來定）。如果有動態(tài)比色法鱟試劑那就多一種選擇（當然要看你的投入成本）。
相信通過以上介紹您對鱟試劑已經有一定了解，聰明的你一定知道如何去選擇鱟試劑了吧！
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