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生物知識

細胞培養常識(三)

作者:admin 來源:本站 發布時間: 2016-09-20 18:43  瀏覽次數:
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冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一:冷凍管置于4度30-60分鐘至-20度30分鐘至-80度16-18小時(或隔夜)至液氮槽vaporphase長期儲存。

冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3度至-80度以下,再放入液氮中長期儲存。-20度不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80度冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

2
這細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內有多少細胞濃度

冷凍管內細胞數目一般為1*106 cells/ml vial, 融合瘤細胞則以5*106 cells/ml vial 為宜。

 

3
可否使用應如何避免細胞污染?

細胞污染的種類可分為細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌、主要的污染源因為無菌操作記住不當、操作室環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養基配制是減低污染之最好方法。

 

4
這支原體污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?

不能。除極有經驗之專家外,大多數遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之。

 

5
CO2 培養箱之水盤如何保持清潔?

定期(至少每兩周一次)以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。

 

 

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